Detecção de genes blasw e blaTEM relacionados às enzimas β-lactamases em amostras de hemocultura empregando a técnica de amplificação isotérmica de DNA (LAMP)

Abstract

O aumento da prevalência de micro-organismos resistentes aos antimicrobianos é um dos problemas mais graves que atingem os serviços de saúde. Um método de detecção de bactérias produtoras de ESBL é necessário para identificação e controle da disseminação de micro-organismos multidroga resistentes. Neste estudo objetivou-se a detecção dos genes bla_SHV e bla_TEM relacionados a enzimas P-lactamases em amostras de hemocultura de um hospital de Governador Valadares, Minas Gerais, empregando duas técnicas moleculares LAMP e mPCR, bem como comparar a eficiência de detecção de ambos os métodos. Das 108 linhagens bacterianas (Gram-positivas e Gram-negativas) foram selecionadas 20 Gram-negativas que apresentaram maior perfil de resistência aos antimicrobianos testados pelo método Kirby- Bauer. Foram extraídos o DNA das 20 hemoculturas selecionadas, e posteriormente realizou-se os ensaios de LAMP e mPCR para pesquisa dos genes de interesse. Destas, 15 linhagens foram resistentes à pelo menos 3 classes de antimicrobianos e em todas as linhagens de bactérias testadas, os resultados de detecção dos genes foram semelhantes em ambas as técnicas, com exceção de uma amostra de Klebsiella ozanae, cujo gene bla_SHV foi detectado apenas pela técnica de LAMR A técnica de LAMP demonstrou-se mais eficiente por ser realizada em menor tempo, não necessitar de equipamentos sofisticados, além da fácil interpretação dos seus resultados.